一、質(zhì)粒干粉（負(fù)20度保存，保質(zhì)期90天，常溫運輸）

1、收到干粉質(zhì)粒后請先5000rpm離心1min,再加入20μl無菌水溶解質(zhì)粒；

2、將相應(yīng)的感受態(tài)于冰盒上解凍，取2μl質(zhì)粒加至100μl感受態(tài)中，冰浴 30min；

3、42度熱激60s，冰浴2min，加入900μl無抗LB培養(yǎng)基，180rpm震蕩培養(yǎng)45min；

4、6000rpm離心3min，留100μl上清重懸，再涂至對應(yīng)抗性的LB平板上；

5、倒置培養(yǎng)過夜后，如菌落過多則稀釋質(zhì)粒轉(zhuǎn)化，如沒有菌落則取10ul質(zhì)粒轉(zhuǎn)化；

6、挑單菌落至對應(yīng)抗性的LB液體培養(yǎng)基中過夜震蕩培養(yǎng)，根據(jù)需要提取質(zhì)粒。

一、液體質(zhì)粒（負(fù)20度保存，保質(zhì)期90天，冰袋運輸）

1、收到液體質(zhì)粒后請甩動保存管，讓液體質(zhì)粒不要吸附在管壁上；

2、根據(jù)實驗需求取適量質(zhì)粒，其余保存于負(fù)20度冰箱。

二、甘油菌種（負(fù)80度保存，保質(zhì)期90天，冰袋運輸）

1、收到甘油菌種后請甩動保存管，讓菌液不要吸附在管壁上；

2、用接種環(huán)在固體平板上四區(qū)劃線，如有抗性就加對應(yīng)抗性；

3、恒溫培養(yǎng)箱倒置培養(yǎng)12~16h；

4、務(wù)必挑取單菌落接種于液體培養(yǎng)基中，如有抗性就加對應(yīng)抗性；

5、搖床震蕩培養(yǎng)過夜，根據(jù)實驗需要培養(yǎng)菌種。

 三、平板菌種（4度保存，保質(zhì)期7天，冰袋運輸）

直接挑取單菌落至液體培養(yǎng)基中，根據(jù)實驗需要培養(yǎng)菌種。